封面 书名页 内容简介 版权页 前言 目录页 第1章 绪论 1.1 亚硝酸盐与食品 1.1.1 亚硝酸盐在食品行业的应用 1.1.2 亚硝酸盐对人体的危害 1.1.3 酱腌菜和泡菜中亚硝酸盐的产生与控制 1.2 亚硝酸盐还原酶 1.2.1 亚硝酸盐还原酶降解亚硝酸盐途径 1.2.2 亚硝酸盐还原酶的分类 1.2.3 亚硝酸盐还原酶的功能 1.3 植物乳杆菌 1.3.1 植物乳杆菌的功能 1.3.2 植物乳杆菌的脱氮能力 1.3.3 植物乳杆菌在酱腌菜和泡菜中的应用 1.3.4 植物乳杆菌WU14 1.4 细菌氮代谢研究 1.4.1 调控因子与启动子的相互作用 1.4.2 GlnR调控因子 1.4.3 Fnr调控因子 1.4.4 Fnr调控因子对细菌氮代谢的调控 1.4.5 luxS和HK等全局性调控因子对亚硝酸盐代谢的调控 1.5 植物乳杆菌遗传转化体系 1.5.1 国内外研究进展 1.5.2 工业应用 参考文献 第2章 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14的Nir食品级高效诱导表达及其酶学性质研究 2.1 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14对亚硝酸盐降解能力分析 2.2 Nir基因克隆和生物信息学分析 2.3 重组质粒pRNA48-Nir的构建及Nir诱导表达 2.4 植物乳杆菌WU14的基因组测序和分析 2.5 结论 参考文献 第3章 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14中GlnR与Nir相互作用研究 3.1 Trans 1/pET-30a/Nir表达载体的构建与检测 3.1.1 亚硝酸盐还原酶保守片段Nir的获取 3.1.2 Nir诱导表达载体的构建 3.1.3 Nir蛋白诱导与SDS-PAGE分析 3.2 植物乳杆菌GlnR基因克隆和表达载体的构建与检测 3.2.1 T3-glnR构建 3.2.2 pET-30a-glnR的表达载体构建 3.3 GlnR与Nir启动子体外相互作用研究 3.3.1 pNir启动子基因扩增及Trans1/T3/pNir菌落PCR验证 3.3.2 GlnR基因片段的重新获得 3.3.3 诱饵载体与表达载体的构建 3.3.4 细菌单杂交实验诱饵载体与表达载体酶切验证 3.4 结论 参考文献 第4章 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14中GlnR与Nir表达调控机制研究 4.1 利用酵母双杂交研究GlnR与Nir的互作与表达调控 4.1.1 亚硝酸盐还原酶（Nir）基因和GlnR基因的克隆 4.1.2 GlnR-pGBKT7诱饵载体和报告载体Nir-pGADT7的构建 4.1.3 菌落PCR检测重组载体pAD-Nir和pBD-GlnR 4.1.4 融合载体的自激活和毒性检测 4.1.5 亚硝酸盐还原酶（Nir）和调控蛋白GlnR相互作用分析 4.1.6 植物乳杆菌WU14 RNA的提取 4.2 凝胶阻滞验证GlnR蛋白与Nir互作和表达调控 4.2.1 PCR扩增GlnR基因 4.2.2 pPIC9-GlnR表达载体的构建 4.2.3 SDS-PAGE分析重组载体pPIC9-GlnR的表达产物 4.2.4 pET-30a-GlnR表达载体的构建 4.2.5 GlnR蛋白的诱导表达与纯化 4.2.6 GlnR蛋白与亚硝酸盐还原酶（Nir）的相互作用 4.3 qRT-PCR实验分析亚硝酸盐胁迫GlnR对Nir的表达调控作用 4.3.1 WU14生长曲线测定 4.3.2 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） 4.4 结论 参考文献 第5章 Fnr参与植物乳杆菌WU14亚硝酸盐降解的调控机制 5.1 Fnr和GlnR的重组表达和纯化 5.1.1 fnr和glnR基因扩增及序列分析 5.1.2 Fnr和GlnR克隆载体的构建 5.1.3 Fnr和GlnR重组表达质粒的构建 5.1.4 Fnr和GlnR重组蛋白的诱导表达、纯化和检测 5.2 凝胶阻滞（EMSA）验证Fnr和GlnR与nir启动子的相互作用 5.2.1 PglnR和Pnir启动子序列的扩增生物素标记 5.2.2 EMSA验证Fnr与Pnir启动子的互作 5.2.3 EMSA验证GlnR和Pnir启动子的互作 5.2.4 EMSA验证Fnr和PglnR启动子的互作 5.3 qRT-PCR验证fnr和nir的相对表达量 5.3.1 不同培养条件下植物乳杆菌WU14的生长曲线 5.3.2 植物乳杆菌WU14降解NaNO_2能力测试 5.3.3 植物乳杆菌WU14的RNA提取 5.3.4 RNA反转录 5.3.5 fnr和nir相对表达量验证 5.4 结论 参考文献 第6章 植物乳杆菌WU14 L-阿拉伯糖异构酶分子生物学、发酵工艺优化及热稳定性分子改良 6.1 高产D-塔格糖植物乳杆菌WU14的L-AI基因的分析、食品级诱导表达及其酶学性质的研究 6.1.1 植物乳杆菌WU14生物转化D-塔格糖分析 6.1.2 L-AI基因的扩增与TA克隆 6.1.3 高产D-塔格糖乳酸菌L-AI基因的核苷酸序列分析 6.1.4 高产D-塔格糖乳酸菌L-AI蛋白的二级结构预测分析 6.1.5 高产D-塔格糖乳酸菌L-AI蛋白跨膜螺旋分析和信号肽分析 6.1.6 高产D-塔格糖乳酸菌L-AI蛋白的三级结构预测分析 6.1.7 高产D-塔格糖植物乳杆菌WU14的L-AI酶学性质研究 6.1.8 重组PCR技术去除植物乳杆菌WU14 L-AI基因中的NcoⅠ酶切位点 6.1.9 重组质粒pRNA48-L-AI的构建及验证 6.1.10 SDS-PAGE筛选nisin诱导L-AI基因表达的最佳诱导剂量及诱导时间 6.1.11 L.lactisNZ9000/pRNA48-L-AI重组菌的遗传稳定性分析 6.1.12 L.lactisNZ9000/pRNA48-L-AI重组菌的L-AI酶学性质研究 6.2 植物乳杆菌WU14高产D-塔格糖的发酵工艺优化和分离提纯研究 6.2.1 L-AI发酵动力学模型研究 6.2.2 D-塔格糖分离纯化的研究 6.2.3 硼酸盐催化L-AI产D-塔格糖的研究 6.3 植物乳杆菌WU14的L-AI耐热性分子改良 6.3.1 L-AI同源建模 6.3.2 突变位点的预测 6.3.3 突变体的表达 6.3.4 野生型及突变型L-AI最适温度及热稳定性的测定 6.3.5 野生型及突变型L-AI最适pH及pH稳定性的测定 6.4 结论 参考文献 第7章 植物乳杆菌WU14 6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因克隆、蛋白质表达以及生物信息学分析 7.1 植物乳杆菌WU14的8个β-葡萄糖苷酶编码基因的克隆 7.2 SDS-PAGE分析重组蛋白 7.3 目的基因BglAW14、BglBW14、BglCW14、BglDW14、BglEW14、BglFW14、BglGW14和BglHW14的生物信息学分析 7.3.1 氨基酸序列分析、跨膜结构和信号肽预测 7.3.2 氨基酸序列比对分析及系统发育树分析 7.3.3 蛋白质二级结构预测 7.3.4 亚细胞定位 7.4 结论 参考文献 封底 ..更多